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芦荟的药物生物活性成分的研究(四)
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1 水提取法
水提取法是较为传统的提取工艺,成本低,操作简单,适用于游离态多糖提取,且干扰物质少、易除去,但提取时间长且效率低。
韩秋菊等采用热水浸提法提取木立芦荟多糖,通过正交试验优化提取工艺,分析主要影响因素。结果显示,最佳提取工艺条件为:浸提温度70 ℃、浸提时间4 h、料液比1∶20、提取次数3次。在此工艺条件下,木立芦荟多糖的提取率达5.48%。
杨子珍等采用星点设计-响应面法,选取提取温度、提取时间、液料比为自变量,多糖得率作为因变量,优化出的优化芦荟多糖提取工艺条件为:提取温度39.22 ℃,提取时间3.05 h,液固比29.62 mL/g,多糖得率9.704%。
张志强等采用水提醇沉法提取芦荟多糖,以甘露糖标准液绘制标准曲线,用苯酚-硫酸、紫外分光光度法于490 nm波长处测得芦荟多糖的含量为8.796 mg/mL。
2 超声波辅助提取法
超声波辅助提取是在水浸提的同时加超声波辅助,不仅缩短提取时间、提高提取率,而且避免高温对有效成分的影响。何思微等采用热水浸提法、微波辅助法和超声波辅助法提取库拉索芦荟中的芦荟多糖,结果表明,超声波辅助法有利于芦荟多糖提取,超声波辅助法的最佳提取条件为:超声波功率800 W,超声波时间9 min,料液比1∶30(g/mL),芦荟多糖提取率5.42%。超声波辅助法芦荟多糖的提取率分别比热水浸提法和微波辅助法提高4.43%和3.83%。
何沂飞等研究响应曲面法优化库拉索芦荟凝胶多糖的超声辅助提取工艺,考察超声功率、超声时间、提取温度、提取液pH和液料比等因素对芦荟多糖提取率的影响,在单因素试验的基础上采用4因素3水平的响应曲面分析法确定的提取工艺最优条件为:超声功率600 W,超声时间45 min,提取温度70 ℃,提取液pH 8.9,液料比5�E1,超声提取1次,多糖提取率为0.151 1%。
3 微波辅助提取法
微波辅助提取是在水浸提的同时加入微波,与传统的水浸提法相比,具有选择性高、操作时间短、溶剂消耗小、有效成分收率高的特点。
马艳弘等研究芦荟皮多糖的微波辅助提取工艺及其抗氧化能力,在单因素试验基础上,以微波时间、微波功率、料液比、水提温度为因素,以多糖得率为响应值,采用Box-Benhnke试验进行响应面分析,其结果表明:芦荟皮多糖的最佳微波辅助提取条件为料液比1∶31(g/mL)、微波时间95 s、微波功率400 W、提取温度74 ℃,芦荟皮多糖提取率4.926%。
谌素华等采用响应面分析法对木立芦荟皮多糖的提取工艺进行优化,对提取率影响因素进行单因素分析后,以Box-Behnken设计评价微波时间、提取液pH和液料比3个因素的显著性和交互作用,最终得出木立芦荟皮多糖的最佳提取条件为:微波时间168 s,提取液pH 9,液料比52∶1(mL/g),微波功率320 W,在此条件下提取率14.37%。
4 酶解辅助提取法
芦荟的细胞壁主要由纤维素、果胶等组成,细胞膜主要由蛋白质和磷脂组成,因此可以用具有专一性和高效性的酶(如纤维素酶、果胶酶等)来提取芦荟多糖。
李亚辉等在单因素试验基础上,利用响应面法对复合酶提取芦荟多糖的条件进行优化,结果显示,当料液比1∶30(g/mL)、果胶酶与纤维素酶配比1∶3、pH 4.5时,优化最佳提取条件为加酶量0.3%、酶解温度48 ℃、酶解时间40 min,此条件下芦荟多糖的提取率为5.65%,比超声波辅助法提高4.2%。
研究表明,除采用单一酶提取外,很多研究还尝试采用酶-超声波双提取法,均获得理想的提取率。闵莉静等采用酶-超声双辅助提取中华芦荟多糖工艺,优化得到的提取条件为:纤维素酶、果胶酶之比(V∶m)1∶2、超声温度80 ℃、超声时间60 min、料液比1∶20、乙醇浓度80%、超声功率300 W、超声次数3次。李亚辉等采用超采用响应面法优化超声波辅助纤维素酶提取芦荟多糖的条件,当料液比1/30(g/mL)、超声波功率600 W、pH 5.0时,最佳提取条件为加酶量0.2%、提取温度49 ℃、提取时间16 min。此条件下芦荟多糖的提取率为5.99%,比超声波辅助法和纤维素酶法分别提高了9.91%和37.38%。
5 其它提取方法
除以上常用的提取方法外,也有很多研究采用其它提取技术,如加速溶剂萃取法、超临界CO2萃取法、鲜榨汁法和冷榨汁法、聚乙二醇/硫酸铵双水相体系提取法等,均取得了较好的提取效果。
朱俊玲等优化超临界CO2流体萃取芦荟多糖的工艺为:乙醇用量2.5 mL/g,萃取压力25 MPa,萃取温度35 ℃。静萃取最佳时间为60 min,动萃取时间为30 min,在最优条件下,芦荟多糖得率为85.10%。
陈巧灵等采用L9(33)正交试验结合加速溶剂萃取技术(ASE)对库拉索芦荟皮多糖提取工艺进行优化设计,确定最佳提取工艺条件为:温度180 ℃,静态提取3次,每次18 min,提取温度对多糖提取率具有极显著性影响,提取率为9.03%±0.12%;与传统水提醇沉提取法(多糖提取率6.9%)相比,该提取工艺具有操作简便、提取时间短、节能耗、多糖得率高等优点,是一种快速经济实用的新型工艺。
唐建红等比较4种工艺提取芦荟凝胶中芦荟多糖的含量,以D-甘露糖作为对照品,采用紫外分光光度法在610 nm处测吸光度,确定鲜榨汁法、冷榨汁法、超声提取法及酶提取法的芦荟多糖含量分别为2.202,1.604,2.000 mg,2.150 mg/g。
芦荟多糖作为一种纯天然的活性成分,具有调节免疫、抗病毒、抗肿瘤、抗癌和防止糖尿病等功能,受到医药和保健领域的广泛关注。但由于芦荟多糖提取工艺复杂、收率低、成本高,限制了其应用。关于芦荟多糖提取的研究还需进一步深入,通过大量的试实验研究使芦荟能更大规模用于制药生产和新型保健用品开发。
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