药物代谢机理及药物相互作用研究(三)

3.2.4 酶诱导能力的评价：目前的研究还未发现CYP2D6具有可诱导性。有关报道显示CYP2D、CYP2B能与CYP3A协同诱导，而CYP3A几乎对所有已知的协诱导物敏感。因此，如果要考察试验药对CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9，CYP2C19以及CYP3A是否有诱导作用，则在最初的体外诱导试验中，可以只考察CYP1A2和CYP3A。如果体外试验表明试验药不能诱导CYP3A的代谢，则试验药与经CYP2C/CYP2B和CYP3A代谢的合用药之间的诱导性相互作用研究没有必要进行。由CYP2B6引起的药物相互作用尤为重要，合适的时候也需要进行体外评价。而其它CYP酶，包括CYP2A6和CYP2E1，在临床中较少引起严重的药物相互作用，但某些情况下也需要进行考察。

体外诱导试验的模型一般推荐使用原代肝细胞。在评价药物是否能诱导某一CYP酶时，需要阴性对照和阳性对照。阳性对照应为有效的诱导剂（即浓度<500μM时，能使催化活性增加2倍以上的诱导剂），可解释来源于不同个体的肝细胞其酶活性是否存在差异。

根据下列公式计算，当试验药引起酶活性的改变与阳性对照相比40%时，可视为酶诱导剂。另外，也可选用EC50值（产生50%最大诱导作用时的有效药物浓度）作为指标，比较不同药物的诱导能力。

% 阳性对照= 

   此外，还有其他一些体外鉴定酶诱导作用的实验方法，如：用Western免疫印迹法或免疫沉淀法来测定酶蛋白含量的变化，用RT-PCR在mRNA水平测定酶含量的变化，或者进行受体基因试验。但是这些试验只能提供支持性的资料，并不一定能体现酶活性。

3.3体内研究设计：体内药物-药物相互作用研究的设计思路，一般为比较相互作用药物存在或不存在的情况下底物的浓度变化。

当试验药作为相互作用药物（酶的诱导剂或抑制剂）来研究时，早期体内研究中底物可根据试验药所影响的P450酶系来选择(表3)。如果早期研究结果显示试验药能抑制或诱导代谢，则后期研究可采用具有代表性的有可能合用的其他药物作为底物。如果在前期研究中，对于最敏感的底物（表4）结果为阴性，则可以得出结论，其它较不敏感的底物也不会影响其代谢。

表 3 体内试验（口服给药）常用的CYP酶底物、抑制剂以及诱导剂

CYP 底物 抑制剂 诱导剂

1A2 茶碱、咖啡因 氟伏沙明 比较吸烟者与非吸烟者 

2B6 依法韦仑 利福平

2C8 瑞格列奈、罗格列酮 吉非贝齐 利福平

2C9 华法林、甲苯磺丁脲 氟康唑、胺碘酮（比较PM与EM） 利福平

2C19 奥美拉唑、埃索拉唑、

兰索拉唑、泮托拉唑 奥美拉唑、氟伏沙明、吗氯贝胺（比较PM与EM） 利福平

2D6 地昔帕明、右美沙芬、

阿托西汀 帕罗西汀、奎尼丁、氟西汀（比较PM与EM） 无

2E1 氯唑沙宗 disulfirum 乙醇

3A4/3A5 咪达唑仑、丁螺环酮、

非洛地平、洛伐他汀、

依来曲普坦、昔多芬、

辛伐他汀、三唑仑 阿扎那韦、克拉霉素、茚地那韦、伊曲康唑、酮康唑、奈法唑酮、那非那韦、利托那韦、沙奎那韦、泰利霉素 利福平、卡马西平

注：最新表格见链接

表4  CYP的敏感底物及治疗窗窄的底物

敏感底物 治疗窗窄的底物

CYP1A2 度洛西汀、阿洛司琼 茶碱、替扎尼定

CYP2C8 瑞格列奈 紫杉醇

CYP2C9 华法林、苯妥英

CYP2C19 奥美拉唑 S-美芬妥英