灰葡萄孢（Botrytis cinerea）T-DNA插入突变体研究

浙江工业大学毕业设计（论文）申报表
                                                                                    
2010年   11  月  9   日
题   目 灰葡萄孢（Botrytis cinerea）T-DNA插入突变体研究
专   业 生物技术 学生人数 1
指导教师 朱廷恒 职    称 副教授
课题内容：(国内外现状简介；重点要解决的问题)
 灰霉菌又名灰葡萄孢（Botrytis cinerea），可以引起200多种植物灰霉病，包括黄瓜、番茄、葡萄等重要的经济作物。目前对灰霉菌的分子生物学研究比较薄弱，生长、产孢、生物学、生理生化、抗药性、致病性等分子机制还不清楚，从分子水平研究其相应机制可以为防治该菌提供科学依据。
 重点解决的问题是构建和研究灰葡萄孢T-DNA突变体，进行表现型鉴定，克隆相关基因。
课题的准备情况及对学生的要求：（文献、仪器设备、材料、预做、实验场所（工作地点）及学生须具备的技能）
 已有的材料：灰葡萄孢单倍体菌株
 文献：Rolland S, et al. 2003. Agrobacte-rium-mediated transformation of Botrytis cinerea, simple purification of monokaryotic transformants and rapid co-nidia-based identification of the transfer-DNA host ge-nomic DNA flanking sequences. Current Genetics, 44 (3): 164-171.；
 Mathias C,et al.2007. Botrytis cinerea virulence factors: new insights into a necrotrophic and polyphageous pathogen. FEMS Microbiology Letters,277(1):1 – 10.
要求：态度端正，勤奋好学。    实验场所：分子调控学团队 生环楼510
课题内容性质 理论研究/ √实验研究/ 工程设计/ 工程技术研究/ 软件开发
课题来源性质 √教师科研课题/教师收集的生产实际的课题/学生自立课题 类型 设计/√论文
 实习地点及时间 生环楼510（201011-201106） 用机时数 
学科负责人意见：

                                                                                       签名：                                 年    月    日
 
主管院长意见：

                   签名：                                 年    月    日

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2010年   11  月  9   日
题   目 灰葡萄孢（Botrytis cinerea）致病相关基因研究
专   业 生物技术 学生人数 1
指导教师 朱廷恒 职    称 副教授
 课题内容：(国内外现状简介；重点要解决的问题)
 灰霉菌又名灰葡萄孢（Botrytis cinerea），可以引起200多种植物灰霉病，包括黄瓜、番茄、葡萄等重要的经济作物。研究表明灰葡萄孢可以产生水解酶、毒素、活性氧等来杀死植物。目前对灰霉菌抗药性和致病性等分子机制还不清楚，从分子水平研究其相应机制可以加深对其和植物互作的认识。
 重点解决的问题是对筛选出的致病突变体进行研究，包括表型鉴定、功能分析等。
课题的准备情况及对学生的要求：（文献、仪器设备、材料、预做、实验场所（工作地点）及学生须具备的技能）
 已有的材料：灰葡萄孢突变体
 文献：Rolland S, et al. 2003. Agrobacterium-mediated transformation of Botrytis cinerea, simple purification of monokaryotic transformants and rapid co-nidia-based identification of the transfer-DNA host ge-nomic DNA flanking sequences. Current Genetics, 44 : 164-171.
 Liu YG,et al. 1995 Thermal asymmetric interlaced PCR:automatable amplification and sequencing of insert end fragment from P1 and YAC clones for chromosome walking. Genomics. 25: 674 - 681.
 要求：态度端正，勤奋好学。    实验场所：分子调控学团队 生环楼510
课题内容性质 理论研究/ √实验研究/ 工程设计/ 工程技术研究/ 软件开发
课题来源性质 √教师科研课题/教师收集的生产实际的课题/学生自立课题 类型 设计/√论文
 实习地点及时间 生环楼510（201011-201106） 用机时数 
学科负责人意见：

                                                                                       签名：                                 年    月    日
 
主管院长意见：

                   签名：                                 年    月    日

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2010年   11  月  9   日
题   目 农杆菌介导的灰葡萄孢突变体构建
专   业 生物技术 学生人数 1
指导教师 朱廷恒 职    称 副教授
 课题内容：(国内外现状简介；重点要解决的问题)
 灰霉菌又名灰葡萄孢（Botrytis cinerea），可以引起200多种植物灰霉病，包括黄瓜、番茄、葡萄等重要的经济作物。利用农杆菌介导法构建T-DNA插入突变体库，筛选出相应的表现型并对其进行鉴定是目前采用的有效研究分子水平上的致病等机制的重要手段，可以为防治该菌提供科学依据。
 重点解决的问题是利用农杆菌转化法将T-DNA转入灰葡萄孢、创建插入失活的基因突变体库。
课题的准备情况及对学生的要求：（文献、仪器设备、材料、预做、实验场所（工作地点）及学生须具备的技能）
 文献：Rolland S, et al.2003.Agrobacte-rium-mediated transformation of Botrytis cinerea, simple purification of monokaryotic transformants and rapid co-nidia-based identification of the transfer-DNA host ge-nomic DNA flanking sequences. Current Genetics, 44 (3): 164-171.
 Mathias C,et al.2007. Botrytis cinerea virulence factors: new insights into a necrotrophic and polyphageous pathogen. FEMS Microbiology Letters,277(1):1 – 10.
 要求：态度端正，勤奋好学。    实验场所：分子调控学团队 生环楼510
课题内容性质 理论研究/ √实验研究/ 工程设计/ 工程技术研究/ 软件开发
课题来源性质 √教师科研课题/教师收集的生产实际的课题/学生自立课题 类型 设计/√论文
 实习地点及时间 生环楼510（201011-201106） 用机时数 
学科负责人意见：

                                                                                       签名：                                 年    月    日
 
主管院长意见：

                   签名：                                 年    月    日

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2010年   11  月  9   日
题   目 灰葡萄孢突变体的鉴定和基因功能分析
专   业 生物技术 学生人数 1
指导教师 朱廷恒 职    称 副教授
 课题内容：(国内外现状简介；重点要解决的问题)
 灰霉菌又名灰葡萄孢（Botrytis cinerea），可以引起200多种植物灰霉病，包括黄瓜、番茄、葡萄等重要的经济作物。利用农杆菌介导法构建T-DNA插入突变体库，筛选出相应的表现型并对其进行鉴定是目前采用的有效研究分子水平上的致病等机制的重要手段，可以为防治该菌提供科学依据。
 重点解决的问题是对突变体进行表型鉴定、利用农杆菌转化法将完整的基因转入突变体进行遗传互补等。
课题的准备情况及对学生的要求：（文献、仪器设备、材料、预做、实验场所（工作地点）及学生须具备的技能）
 文献：Rolland S, et al.2003.Agrobacte-rium-mediated transformation of Botrytis cinerea, simple purification of monokaryotic transformants and rapid co-nidia-based identification of the transfer-DNA host ge-nomic DNA flanking sequences. Current Genetics, 44 (3): 164-171.
 Arbelet D,et al.2010.Disruption of the Bcchs3a Chitin Synthase Gene in Botrytis cinerea Is Responsible for Altered Adhesion and Overstimulation of Host Plant Immunity. Molecular Plant-Microbe Interactions,23(10):1324-1334
 要求：态度端正，勤奋好学。    实验场所：分子调控学团队 生环楼510
课题内容性质 理论研究/ √实验研究/ 工程设计/ 工程技术研究/ 软件开发
课题来源性质 √教师科研课题/教师收集的生产实际的课题/学生自立课题 类型 设计/√论文
 实习地点及时间 生环楼510（201011-201106） 用机时数 
学科负责人意见：

                                                                                       签名：                                 年    月    日
 
主管院长意见：

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2010年   11  月  9   日
题   目 基因工程菌米曲霉(Aspergillus oryzae)产纤维素酶能力研究
专   业 生物技术 学生人数 1
指导教师 朱廷恒 职    称 副教授
课题内容：(国内外现状简介；重点要解决的问题)
 纤维素酶在为开辟食品及发酵工业原料新来源，提高饲料的营养价值，综合利用农副产品和生物质转化方面起着非常重要的作用，具有重要的经济意义。纤维素酶是一类纤维素水解酶的总称，它由c1酶、cx酶等组成，将纤维素分解成纤维二糖，再经过β-葡萄糖苷酶作用，最终变为葡萄糖。重点解决的问题是对转入swollen基因的米曲霉进行产纤维素酶的研究，为开发用于食品等行业的生物安全的纤维素酶打下基础。
 
课题的准备情况及对学生的要求：（文献、仪器设备、材料、预做、实验场所（工作地点）及学生须具备的技能）
 本课题已具备基因工程菌米曲霉。  
 文献：1、Shou Takashima, Hiroshi Iikura, Akira Nakamura. Overproduction of recombinant Trichoderma reesei cellulases by Aspergillus oryzae and their enzymatic properties[J]. Journal of Biotechnology,1998,65:2-3
 2、Rashid Muhammad, Javed Muhammad, Kawaguchi. Improvement of Aspergillus oryzae for hyperproduction of endoglucanase: expression cloning of cmc-1 gene of Aspergillus aculeatus[J]. Biotechnol Letter, 2008,30:2165-72.
 要求学生具备微生物学，生物化学等学科的基本知识及实验操作技能；态度端正，勤奋上进。
课题内容性质 理论研究/ √实验研究/ 工程设计/ 工程技术研究/ 软件开发
课题来源性质 √教师科研课题/教师收集的生产实际的课题/学生自立课题 类型 设计/√论文
 实习地点及时间 生环楼510（201011-201106） 用机时数 
学科负责人意见：

                                                                                       签名：                                 年    月    日
主管院长意见：

                   签名：                                 年    月    日