贝复济（bFGF）冻干粉针的制备及质量控制(二)

    胶塞的灭菌：采用KJCS-2ES全自动湿法超声波胶塞清洗机清洗并灭菌，设定参数为：粗洗2min，漂洗2min，冲洗2min，精洗5min，最后注射用水冲洗2min，然后灭菌121℃，30min待用。 

西林瓶的清洗灭菌：采用SHZ-X西林瓶清洗机清洗，采用超声波和高压注射用水冲洗，设定参数为：注射用水压力0.1Mpa,压缩空气0.7Mpa，采用隧道烘箱330高温瞬时灭菌；

过滤器，配液罐，缓冲罐，采用121℃，30min灭菌待用；30TOFFLO-5冻干机121℃，30min灭菌待用。

2.1.3冻干保护剂的选择

    选择甘露醇，人血白蛋白等作为保护剂。甘露醇可以增加产品的溶解度，调节渗透压，增加产品的牢固度使得产品结构均匀外观整齐。

2.1.4 bFGF冻干粉针制备工艺

2.1.4.1．bFGF冻干粉针药液的配制

    在配制车间，将甘露醇、注射用水按比例配制，经过配液罐，缓冲罐输将bFGF原液、人血白蛋白、混合并经过已灭菌的过滤器，再输送到SHZ-YGX-1灌装机.

2.1.4.2 bFGF冻干粉针药液的灌装

将配制车间输送过来的药液经过灌装机进行灌装，灌至已灭菌的西林瓶，并进行半加塞。调节灌装装量为1.5-1.6g/瓶。灌装应在A级的洁净度环境下进行。

2.1.4.3 bFGF冻干粉针的冻干

首先，根据产品的配方，测试并了解产品的共熔点，如0.85%氯化钠溶液的共熔点为-22℃，10%蔗糖溶液的共熔点为-26℃，2%明胶、10%葡萄糖溶液的共熔点为-32℃等等，设定温度时可以制定略高于共熔点，这一点也要根据设备制定，不同设备设定温度也不同；了解配方各组分的性质，确定产品的最低和高温度和升温速率；确定预真空的真空度和真空速率；根据产品水分要求和灌装厚度确定冻干时间，一般的话是一小时升华一毫米厚度，厚度一般不要超过10毫米，如果是试验的话可以增加一个参照物作为参考；根据冻干设备的性能，制定一个合理的冻干曲线。

根据冻干曲线，了解冻干过程。过程分为预冻，干燥。预冻分为速冻和慢冻，慢冻产生的冰晶大，速冻产生的冰晶小，所以冻干出来的冻干粉更加疏松多孔，有更好的复水性，而且对细胞影响小，慢冻容易引起细胞的死亡，但大的冰晶有力于升华，小的冰晶不利于升华；预冻是一个非常重要的过程。它很大部分决定冻干粉冻干出来的形状。干燥分为第一阶段干燥和第二阶段干燥两阶段，第二阶段干燥也叫做解吸干燥。

第一阶段干燥，真空度控制在0.1-0.3mbar,真空控制由泄露孔控制，这时升华掉90%的水分，第二阶段干燥可以升温至最高温度，并保持1-2小时。

根据bFGF冻干粉针配方，设定预冻温度和时间：从常温至-40℃，用时30 min，保温150min；设定第一阶段干燥：设定预抽真空为0.15 mbar，冷凝器预降温度-45℃；设定升温从-40℃至-5℃，时间为120min,真空控制0.15mbar；设定保温-5℃，480 min,；设定升温至0℃，时间180 min，真空控制0.15mbar；设定0-30℃，用时120 min，真空控制0.15mbar。

第二阶段干燥：设定温度30℃，保温300 min，真空控制：前180 min控制为0.15 mbar，后120 min控制为极限真空，结束前可进行压力升试验 ，可根据实验设定压力升数据。

冻干过程除了密切关注和控制各个参数外，还要时刻关注冻干机的运行情况，密切关注冻干机各个阀门，压力表，各个探测器等等是否正常。

冻干结束后进行压塞，先计算压塞压力并设定好，选择真空压塞或者或者注入无菌空气或者充氮压塞等等。最后完成出箱，检查结果，本次冻干结果是：胶塞密封密闭，瓶子完好无损，冻干粉牢固固定于瓶底，冻干粉结构多孔疏松，颜色白色，是一次成功的工作。

2.2 贝复济（bFGF）冻干粉针的质量控制

2.2.1材料和仪器

METTLER TOLEDO XS105DU电子天平，CS101-1EB电热鼓风干燥箱，LRH-250生化培养箱，采用高效液相色谱仪，METTLER TOLEDO FE20型PH计,YB-11型澄明度检测仪

2.2.2测量方法与测量结果

2.2.2.1 装量差异：

取供试品5瓶除去瓶盖，精密称重后，除去内容物，用纯化水洗净并干燥，干燥后再精密称定每一容器重量，算出每一批平均值。结果平均值为0.0980g（范围0.0880-0.100）结果合格。

2.2.2.2外观结构：

在自然光下，直接观察，整齐牢固，不分层，不起泡，不萎缩，不松散，呈白色疏松状，结果合格

2.2.2.3复溶性和澄明度：

取供试品5支，分别加入注射用水，结果都在1 min溶解（标准：应在10 min内溶解为澄明液体，没有金属屑、玻璃屑、纤维，直径大小的毛和白点、白块或色点在黑、白底下20秒内目检，都在规定数内）结果合格。

2.2.2.4产品PH值：

在一定温湿度环境下，用三个标准缓冲液校正显示PH值，校正后再测标准缓冲液PH值为6.99，取5支冻干粉加入相应的溶媒，溶解后测定PH值为7.0（标准为6.5-7.5）

2.2.2.5 无菌试验：

膜过滤法。取供试品贝复济（bFGF）冻干粉20套，无菌开启并溶解，把溶液抽到集菌培养器中，进行过滤。过滤后用PH7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜。冲洗完毕，向其中两个培养器各抽入100ml硫乙醇酸盐流体培养基，另一培养器抽入100ml胰酪大豆胨液体培养基。同法，用无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液代替供试品制作阴性对照。将硫乙醇酸盐流体培养基置30-35℃培养，其余20-25℃培养，逐天观察，不少于14天，应无长菌。结束后，向硫乙醇酸盐流体培养基加入小于100cfu/ml的金黄色葡萄球菌液1ml做阳性对照，培养30-35℃，48小时菌应生长良好。结论无菌合格。

2.2.2.6活性：

活性>350000 IU/mg （大于等于35000万国际单位/毫克）。

2.2.2.7水份残留：

水分残留< 3.0%（药典标准< 5.0%）。

2.2.3讨论

严格的检测是有效保障产品质量的重要方法之一，只有对产品各个指标进行测试，对生产和检测各个过程进行有效监控，才能生产出符合要求的产品。

每个图都应有图说明，图说明包含图编号与图题(即图的名称)；各种图均要求统一编号，图题与图编号空一字距，居中排印在图的下方，图与图说明不能破页。只有1个图也要有图说明。如图2-1，2表示第2章节，1表示本章的图的序号。图中文字、数字应植字。

坐标图纵横标目的量和单位符号应齐全，居中置于纵横坐标的外侧，横坐标的标目自左至右；纵坐标的标目自下而上，右侧纵坐标的标目方式与左侧相同。

照片应标染色方法和放大倍数，必要时应附有表示目的物尺寸大小的标度。图中的量、符号、单位以及缩略词等必须与正文一致，表亦然。图一般随正文，先见文字后见图。

图2-1样板：

图2-1 流程图

　结论

bFGF具有药用和美容方面的价值，在这两方都有广泛的应用。贝复济（bFGF）冻干粉针是一种药品， 药品是一种特殊的商品，关系到人的身心健康的重要问题，药品质量至关重要，要求高。药品质量形成于生产过程，质量检验具有破坏性（经检验的药品不再具有使用价值）。所以药品的质量是生产出来的，不是检验出来的，药品生产过程中的质量控制与保证的关键在于有效的预防。所以在生产过程中必须严格按照各个岗位的操作规程执行，严格按照GMP办事。不但要求生产和质量相关人员要有相关的知识、技术和技能，更重要的是必须要有高尚的职业道德，生产和检验人员必须要有正确的人生观和价值观。生产过程中有效控制所有可能影响药品质量的因素，保证所生产的药品不混淆、无污染、均匀一致，在经取样检验分析合格，这样的药品质量才有真正、切实的保证。

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