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王不留行抗人肝癌细胞株HepG2的作用研究(一)
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1.绪论
肝癌(liver cancer)是指发生于肝脏的恶性肿瘤,包括原发性肝癌和转移性肝癌两种,人们日常说的肝癌指的多是原发性肝癌。原发性肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一,根据最新统计,全世界每年新发肝癌患者约六十万,居恶性肿瘤的第五位。原发性肝癌的病因及确切分子机制尚不完全清楚,目前认为其发病是多因素、多步骤的复杂过程,受环境和机体双重因素影响。
现代研究表明,王不留行花炒爆后入药,易于煎出有效成分,且走散力较强,长于活血通经、下乳、通淋。
国内外对王不留行的研究主要集中在化学成分方面,王不留行种子含多种环苷、环肽和黄酮苷类成分,如洋芹素-6-c-阿拉伯糖-葡萄糖苷,洋芹素-5-C-双葡葡糖苷,王不留行黄酮苷等,但未对其抗氧化活性及抗肿瘤作用方面尚缺乏系统且深入的研究
目前王不留行抗肿瘤活性多有报道,但大多集中于活性成分及复发中药研究领域。王不留行具有抗肿瘤作用,多用于乳腺癌,肝癌,肺癌及其他软组织之恶性肿瘤。对各种良性肿瘤特别是乳腺良性肿块有一定疗效。但对于其详细的体外抗肿瘤尤其是肝细胞肿瘤的活性及抗肿瘤作用机制的研究报道较少。有报道显示王不留行经过一系列分离纯化得到组分能明显抑制内皮细胞增殖、迁移及粘附[1,2]。至今,有关王不留行体外抗肿瘤活性研究报道较少,缺乏系统且深入的研究。
2实验材料和方法
2.1材料与仪器
2.1.1仪器
垂直层流洁净工作台
上海上净净化设备有限公司
CO2培养箱
日本ANYO公司
低/高速台式离心机
上海安亭科学仪器厂
酶标仪
伯乐生命医学产品有限公司
倒置生物显微镜
重庆光电仪器有限公司
96孔板
美国Coning公司
立式压力蒸汽灭菌器
上海申安医疗器械厂
鼓风干燥箱
上海跃进医疗器械厂
电子天平
奥豪斯仪器有限公司
旋转蒸发仪(SB–1000,N–1000)
日本东京理化株式会社
流式细胞分析仪
BectonDickinsonFACScan,FranklinLakes,NJ,USA
2.1.2试药及试剂
RPMIMedium1640培养液
美国Hyclone公司
胎牛血清
美国HyClone公司
胰蛋白酶
北京拜尔迪生物公司
MTT四甲基偶氮唑盐
美国Amresco公司
二甲基亚砜
国药集团化学试剂有限公司
台盼蓝
Amresco公司
盐酸阿霉素
中国药品生物制品检定所
药用乙醇(95%)
盘锦天源药业有限公司
其他试剂均为分析纯
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