现代生物技术在口服微粒给药系统中的研究(三)

(3)对于像蛋白质和多肽等这些在胃肠道易受破坏、且吸收部位特异的药物,应用粘膜粘附剂可使其在结肠定位释药、使药物免遭破坏.但口服生物粘附剂受影响因素很多,如饮食、个体差异、胃肠道蠕动、消化道粘膜层更新和消化液的pH值等 .目前其研究仍处于临床前阶段.可以预计,口服生物粘附制剂不久将会成为一个非常重要的剂型,对提高蛋质及多肽类药物的口服生物利用度作出巨大的贡献.

7.应用病毒载体 　参考应用反义脱氧寡核苷酸融合基因病毒脂质体对抗细胞循环基因、对抗转移基因编码一氧化氮合成酶的表达,选择一些耐受消化酶的病毒与大分子药物结合,口服后,前者将后者载运入细胞浆.这种技术利用病毒外壳在胃肠道中的稳定性，对药物的可融性及对细胞的攻击性.由于种种原因,国际报道较多,国内已有学者近年开始着手这方面的研究.

        第三章  现代生物技术的具体应用

（一）聚合物微粒

目前已应用不同的聚合物材料制备了从纳米级至几百微米的微粒,其中大多在体内可以降解.典型的例子如聚乳酸一羚基乙酸共聚物( LG A )、聚配、甲基丙烯酸醋、聚睛基丙烯酸烷基醋等等.LGA是研究最广泛的,它在体内可降解成乳酸与羟基乙酸.其与促黄体生成激素释放激素(LHRH) 的类似物制成聚合物纳米粒,在小鼠体内运用放射性免疫法进行测定,结果显示在给药约2小时后,血浆中即能检测出LHRH的存在、如将游离的LHRH单独给药--则在血浆中并没有检测到其存在，不同的多糖及蛋白质也可被用来制备微粒.已有小组研究制备壳聚糖微球进行口服给药.将多糖类化合物作为口服给药载体的优势在于它的可生物降解性

（二）脂质体微粒

最常见的剂型就是脂质体，脂质体是含有亲水性内核的双分子层球形小囊.在包裹亲脂性药物的同时也可载运水溶性药物，且其制备条件温和，可最大限度的避免药物在制备过程中的失活，例如：用双层脂质体载运鲑鱼降钙素口服给药，显著降低了血浆中钙离子的水平，其生物利用度达到2-4%，如单纯给予鲑鱼降钙素溶液则无降血钙作用，给予小鼠口服重组人表皮生长因子的脂质体，比单纯溶液给药，其药时曲线增加约2倍.

另外如果在脂质体中加入不同的去氧胆酸那、胆酸钠、单硬脂酸甘油酯等界面活性剂和PVP等水溶性物质，可改善载体的润湿性，灵活调节载体中药物的释放速度，

（三）黏膜黏附给药

黏膜给药是一种较为理想的给药形式,对于提高生物利用度方面有巨大的潜力.微粒与黏液层之间相互作用可使微粒停留在胃肠道中持续释药,尤其对多肽等小分子药物能不同程度地提高生物利用度.需注意由于生物黏附制剂较长时间黏附于黏膜上,释药时间延长,故其半衰期一般不宜过长,以2一8小时为宜.

通过微粒与caco一2细胞系的紧密接触实验发现：具特异生物黏附性的粒子 (如表面用外源凝集素进行了修饰)比未经修饰的粒子黏附效力提高.显微观察黏膜吸附微球在胃肠道中的吸收效率.发现在给药后24h后,大量微球由于生物黏附作用停留在肠吸收细胞(PeyerS结)、脾及肝脏等部位，使其吸收效率提高.

常用的生物黏附材料有卡波姆(Carbopol)、羧甲基纤维素钠(CMC--Na)、羧丙基纤维素(HPC)、羟丙基纤维素(HPMC)等.近些年来用海藻酸盐、亲水凝胶和壳多糖等作为生物黏附材料也取得了一定的进展。Carbopol是应用最早、最广泛的生物黏附材料,为合成MW较高的丙烯酸交联聚合物,通过与黏液/黏膜表面发生相互作用而产生黏附,广泛应用于口腔、结肠、胃、小肠、子宫、阴道、鼻、黏膜和结膜等处，即能延缓药物释放，也可减轻药物不良反应，提高生物利用度.

（四）包衣防降解

由于消化道酶对生物技术药物有降解失活作用，如果将惰性的高分子材料如纤维素、葡聚糖对微粒包衣可保护药物.在用做包衣材料的物质里，聚丙烯酸及其衍生物的酯类在体液中溶胀，不被机体吸收，对人体无毒害,具有pH依赖性,它的多种类型及不同用量对药物的释放有很大的影响，是目前研究中的热点.现已有比较成熟的产品上市,其商品名尤特奇（Eduarigt）。不同聚丙烯酸及其衍生 物的酯类具不同的穿透性能,配合使用可获得理想的释药速度.此外在穿透性能较差的聚丙烯酸及其衍生物的酯类中加人一些水溶性物质如聚乙烯毗咯烷酮 ( PVP)或聚乙二醇(PEG)等,可增加穿透性,调节药物的释放。如在包有疫苗 的糖芯表面喷EudragitL30D肠溶衣,给药后在血浆中会诱导出很强的抗体反应.用聚乙二醇(PEG)包衣的聚乳酸(PLA)纳米粒大大促进破伤风毒素透过肠上皮细胞。在给药后1小时血液循环中检测到的用251标记的PEG包衣的纳米粒数量比未经包衣的PLA纳米粒高5一10倍,而且在给药后至少2 4 小时保持浓度恒 定.

（五）加入吸收促进剂

药物包衣的目的是避免被胃肠道酶降解而失活,但生物利用度仍然较低,如在包衣的同时加入吸收促进剂可以大大提高生物利用度。例如在胰岛素制剂中加人ZOT作为吸收促进剂,由于ZOT可破坏相邻细胞间的紧密连接,故在兔空肠和回肠中胰岛素的吸收量可提高10倍以上.

在月桂酸、月桂酸硫酸钠、甘胆酸钠等吸收促进剂存在的情况下，胰岛素的生物利用度可达到20%一30%,否则生物利用度仅为3.6%.

陈辉等学者以胰蛋白酶作为模型药物,通过体外肠囊翻转实验,以肠囊内外液中酶活力的比值作为评价指标，筛选口服胰岛素的吸收促进剂,考察了胆盐、脱氧 胆酸钠、十二烷基硫酸钠、氮酮、脑磷脂、乙二胺四乙酸(EDT A ) 及其复方的吸收促进效果。结果表明：单独使用时胆盐111号(BSnI)的促吸收率最低,3小时仅为11.8%,脱氧胆酸钠的促吸收率最高,3小时为59.7%;复合吸收促进剂脱氧胆酸钠+氮 酮+脑磷脂能3小时内达到最佳.常用的吸收促进剂有表面活性剂(如月桂醇硫酸 钠、卞泽-58)、脂肪酸(如癸酸、癸酸钠)、水杨酸钠以及胆酸钠等.

（六）加入酶抑制剂

如果在包衣的同时加入酶抑制剂,可以进一步保护药物抵抗胃肠道中众多酶的降解,保持活性，促进吸收。如将胰岛素和aportinin(一种酶抑制剂)一同制成W/O复乳给 药后可大大提高胰岛素在回肠中的吸收.另有研究证明在重组人表皮生长因子溶液中加人大豆胰岛素抑制酶可明显提高其抵抗酶降解的能力.常用的酶抑制剂包括非氨基酸类抑制剂(p-aminobenzamidine.Camostatnlesilate)、氨基酸类或经修饰的氨基酸类(如枯草杆菌抗生素)、肽及经修饰后的肽类(如anr ipain和Chynlostatin)、多肽类蛋白酶抑制剂( Bowman一Birk抑制剂、大豆胰岛素抑制剂)等.但是需注意：如长期使用含有酶抑制剂的蛋白质、多肽类药物制剂可能有极大的毒性,所以应谨慎使用.

（七）靶向给药