栀子及其制剂中主要成分的含量测定方法概述(二)

 桅子油约占桅子果实的12%以上,其富含亚油酸、粘度低、稳定性好,具有镇静、抗惊厥、催眠以及促进学习记忆等功效。桅子油的主要提取方法有压榨法、有机溶剂浸提法、水蒸气蒸馏法、以及超临界流体萃取法和超声波法。

（五）其他

除上面所述几类主要成分外，栀子还含有黄酮类、多糖类、香豆素类、喹宁酸、木质素、单萜苷类及Mn、Zn、Ca、Fe、Cu等微量元素。严欢等[11]采用 UHPLC⁃Q⁃TOF⁃MS 联用仪及 ESI 正离子模式采集检测，在以流速为0.3 ml/min的情况下，用0.1％甲酸水溶液⁃乙腈为流动相进行梯度洗脱并采用以 Peakview 质谱分析软件分析数据,根据数据结果所提供的有关信息并结合相关参考文献，分析发现从栀子花中共检测到 31 种化合物，主要包括环烯醚萜类、三萜类和黄酮类。肖日传等[12]采用多波长 HPLC-DAD，同时测定栀子不同部位7 种化合物的含量,发现去乙酰车叶草酸甲酯在根和茎中含量较高。唐娜娜等[13]采用薄层色谱、破股及凝胶柱色谱法对栀子进行分离纯化，通过理化方法和波谱数据进行结构鉴定，结果显示从栀子中分离得到多个化合物，鉴定结果为丁香酸、油酸、十八酸、槲皮素、芦丁、谷甾醇、京尼平苷、胡萝卜苷等。

三、栀子药理活性研究

（一）栀子黄色素的功效

栀子黄色素是栀子果实中主要色素之一，是一种混合类型色素，栀子黄色素有着水溶性、耐酸碱的优点，是世界上唯一的水溶性类胡萝卜素，有效成分包括西红花素和西红花酸。栀子黄色素安全无毒性且资源丰富，经研究表明栀子黄色素正如同其它的类胡萝卜素 ,具备多种生物学功能，有一定的药理作用及营养价值。栀子黄色素有较强的抗氧化功能，具有保肝、降血糖、降血脂、改善睡眠等功能。藏红花酸有多不饱和共轭烯酸结构，具有多种生物活性，包括保护肝损伤、降血脂及抗肿瘤活性，不仅能显著抑制致突变剂诱发的皮肤癌，而且能够在分子水平抑制原癌基因的启动和癌细胞 DNA 和 RNA 的合成。黎砚书[14]等研究发现栀子黄色素类单体西红花酸、西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅲ对淀粉负荷和蔗糖负荷糖尿病小鼠均有降血糖作用。陈丽萍等[15]研究发现一定浓度下的栀子黄色素具有较强的体外清除自由基能力及显著的抗氧化活性，能够有效地清除羟基、DPPH、ABTS等自由基。李茂星等[16]研究中药栀子中栀子黄色素对高原缺氧运动性疲劳的改善作用，实验结果表明栀子黄色素可能通过提高氧化应激能力、增强能量代谢酶活性、增加能源物质储备、减少不良代谢产物生成与堆积等多方面发挥其抗疲劳功用。

（二）栀子苷的药理活性

栀子苷是栀子属植物的有效活性成分之一，现代药理研究证实栀子具有解热抗炎，防止血栓形成及抗氧化作用。白龙梅等[17]通过分别建立高纯度多巴胺能神经元培养体系、多巴胺能神经元和星形胶质细胞混合培养体系，予以栀子苷预处理后再加入脂多糖作用24h，观察多巴胺能神经元的生存率、TH m RNA的表达及培养基中TNF-α、NO、IL-6、MMP-9和GDNF含量的变化。发现栀子苷通过星形胶质细胞发挥神经保护作用，并呈剂量依赖性。李利娟等[18]采用双侧颈总动脉结扎制备VaD大鼠模型，予VaD大鼠不同剂量栀子苷〔25 mg/(kg·d)、50 mg/(kg·d)、75 mg/(kg·d)〕灌胃，连续治疗4周后，进行水迷宫实验和脑组织病理检查，结果显示栀子苷对血管性痴呆大鼠模型的认知功能损害有防治作用，具有剂量依赖性。

四、栀子及其制剂中主要成分的含量测定方法

（一）高效液相色谱法

高效液相色谱法具有高效、高灵敏度、分析速度快、适用性强等特点，而被研究人员常用测定栀子中藏红花苷类、栀子苷等成分的含量测定。曾彦雯等[19]通过实验探究栀子中活性成分栀子苷的高效液相色谱测定分析条件，发现用高效液相色谱法测定栀子中活性成分栀子苷的最佳色谱柱为C18色谱柱，最佳流动相为甲醇-水，在此条件下，能够有效分离栀子中活性成分栀子苷，且保留性能良好同时能避免使用磷酸等盐类物质对色谱柱造成的伤害及使用乙腈为流动相造成检测成本过高问题。发现当流动相为甲醇-水（60：40时），栀子苷的保留时间控制在 10min 中之内，能有效避免栀子苷保留时间过长等问题，得到的分离度和，峰形都满足色谱分析的需求。张作军等[20]使用 DAD 检测器，以甲醇 -0.3% 的磷酸溶液为流动相，洗脱梯度为0 ～ 30 min，甲醇 25% ～ 95%，0.3% 磷酸溶液 75% ～ 5%，柱温、流速分别为 40℃、1.0 mL/min，Hypersil ODS 参数为5 μm，250 mm×4.6 mm，在检测波长为 237 nm 的条件下对临床上常用的丹栀逍遥合剂中栀子苷进行检测。结果显示丹栀逍遥合剂中栀子苷线性范围为 0.20 ～ 0.70 μg（r ＝ 0.9998），其平均含量为 4.26 mg/g，其平均回收率达 101.4%。表明采用高效液相色谱法测丹栀逍遥合剂中栀子苷含量耗时短、准确率高、易控制制剂质量，使用方便，应予推广。

（二）薄层扫描法

彭金年等[21]先将超声提取栀子样品，后用硅胶 G 高效薄层板条带点样，以氯仿 － 乙酸乙酯 － 无水甲醇( 3∶ 2∶ 1，V/V/V) 为展开剂上行展开，在 240 nm 波长下进行扫描检测。研究发现在 0．240 ～ 0．640 μg/ml 范围内，栀子苷浓度与峰面积呈良好线性关系，相关系数 r =0．999 54，平均回收率为 100． 45% ，RSD 为 1.69%，说明薄层扫描法可用于赣南野生黄栀子中栀子苷的含量测定，且使用方便、准确度及重复性好。张雅丽等[22]以藁本内酯、柴胡皂苷 b2 、白术内酯Ⅲ、芍药苷、栀子苷、甘草苷、丹皮酚和6-姜辣素为指标性成分，分别对加味逍遥提取物和加味逍遥片进行薄层色谱鉴别。结果显示薄层色谱法可鉴别出以上8种成分。张芳等[23]采用薄层色谱法对黄柏八味胶囊中不同组分进行鉴别，同时优化了影响色谱分离效果的主要因素。结果显示栀子、黄柏、甘草、荜拨和红花主要成分分离效果较好，色谱清晰。

（三）薄层-紫外分光光度法

薄层-紫外分光光度法可用于测定栀子中京尼平苷、栀子苷的含量，且该方法简便方便，灵敏度和准确性好。赵成城[24]等在 25 ℃条件下测定了京尼平苷在最大吸收波长 238 nm 处的吸光度，结果显示此法线性范围 6. 4 ～ 38.4μg/ml 内，r = 0.9991，平均回收率为 97.68 % ，RSD =2.72 % ( n = 6) 。温爱平等[25]采用薄层一紫外分光光度法对沙日一汤中栀子苷进行分离和测定，以237nm为测定波长，用硅胶GF254与甲基纤维素钠调匀再用自动铺板器涂布于洁净的玻璃板上晾干、活化，以氯仿:甲醇(3:l)作为展开剂，结果显示分离较好，回收率高，结果较满意。 刘永喜等[26]将洪林 -5汤 先用乙醚脱脂，再用甲醇提取，使用硅胶 HF254板，以氯仿 -甲醇 -氨水 ( 17∶ 3∶ 0. 2)为展开剂，分离出栀子苷后，在 238nm处测定了栀子苷的含量。测定结果结果表明该法准确和精密度较高。吴龙堂等[27]用甲醇提取沙日嘎- 4汤，使用硅胶HF254薄层板，用氯仿-甲醇-氨水(4∶1∶0.2)做为展开剂，栀子苷被分离出后，再使用紫外分光光度法测定在波长238nm处栀子苷的含量。且测定结果准确，精确度较高。

五、研究展望

 栀子属卫生部颁布的第l批药食两用资源，具有护肝利胆、镇静降压、消肿止血等作用。在中医临床常用于治疗黄疸型肝炎、高血压、扭挫伤 、糖尿病等症。此外，栀子还可被用做染料及加工成色素。栀子果实有着极高的药用价值，但也存在众多问题，如有效成分难分离、产量低、毒性研究较少等问题。但就目前而言 ，我国对栀子资源的利用存在一定问题 。我国栀子种植面积大，资源丰厚但我国大多数企业生产的栀子黄色素没有达到国际标准，只能以半成品的形式对外出售。因此，进一步开展栀子黄色素和高纯度栀子苷等有效成分的提取工艺及栀子含量测定方法研究具有重大意义。栀子在果实、花、叶、根等部位的成分实际应用方面存在较大的差异，栀子的花、叶、根中的化学成分也需进一步研究，结合与时俱进不断更新的含量测定技术，为栀子中有效成分的利用提供科学合理的理论依据。

随着人民生活质量的不断提高，对健康问题天也越来越受关注。我国有着丰富的栀子资源，进一步加强对栀子研究，综合开发出多种栀子天然安全产品及药品，具有重要的现实意义。

 

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